肾脏病与透析肾移植杂志 ›› 2018, Vol. 27 ›› Issue (4): 336-341.DOI: 10.3969/j.issn.1006-298X.2018.04.008
摘要:
目的:观察Krüppel样因子4(KLF4)在小鼠肾小球系膜细胞(MES13细胞)中的表达。观察甲基化抑制剂5氮杂胞苷(5azacytidine,5Az)对高糖刺激的MES13细胞中KLF4、IL6、MCP1表达的影响。
方法:常规培养MES13细胞,经高糖(30 mmol/L)处理不同时间后,检测KLF4蛋白表达水平。将细胞分为低糖组、高渗组、高糖组、高糖+不同浓度5Az组,检测KLF4、IL6、MCP1 mRNA和蛋白表达水平。慢病毒质粒转染细胞后,高糖处理0h、48h,检测KLF4、IL6、MCP1 mRNA表达。
结果:高糖处理MES13细胞后,KLF4蛋白表达于24 h开始下调,于48h时下调明显。高糖处理细胞48h后,KLF4 mRNA和蛋白表达明显下调,MCP1、IL6 mRNA和蛋白表达水平明显上调(P<001),加用5Az(5 μmol/L)干预后,KLF4 mRNA和蛋白表达水平明显上调,而IL6、MCP1 mRNA和蛋白表达均较干预前下调。慢病毒质粒转染细胞后,KLF4 mRNA表达明显增加,IL6、MCP1 mRNA表达无明显变化。高糖处理转染细胞48h后,LvNC(hi)组与LvNC组相比,KLF4 mRNA表达水平明显下调,IL6、MCP1 mRNA表达水平明显上调。LvKLF4(hi)组与LvNC(hi)组相比,KLF4 mRNA表达水平明显上调,IL6、MCP1 mRNA表达水平明显下调。
结论:在MES13细胞中存在KLF4表达,且高糖处理可使KLF4表达下调,IL6、MCP1表达上调。高糖引起的MES13细胞炎症与KLF4低表达有关,恢复KLF4表达,可减轻细胞炎症,推测其机制部分与DNA甲基化相关。