摘要:
摘要 目的:观察脂肪酸结合蛋白3(FABP3)过度增加对足细胞脂肪代谢的影响。方法:慢病毒载体转染小鼠永生化足细胞系(HSMPs)以构建稳定过表达FABP3的细胞系。将FABP3-siRNA转染至HSMPs中沉默FABP3,筛选干扰效率最大的FABP3-siRNA片段进行后续干扰实验。实验分组:(1)正常足细胞组(2)NC-siRNA足细胞组(3)FABP3-siRNA足细胞组(4)NC足细胞组(5)FABP3过表达足细胞组(6)正常足细胞+棕榈酸/脂肪酸(PA)组(7)NC-siRNA足细胞+PA组(8)FABP3-siRNA足细胞+PA组(9)NC足细胞+PA组(10)FABP3过表达足细胞+PA组。比色法测定细胞内 TG和游离脂肪酸的含量。定量PCR法检测各组细胞中过氧化物酶增殖激活的受体α(PPARα)、酰基辅酶A氧化酶3(ACOX3)mRNA的表达。Western blot法检测PPARα、ACOX3蛋白表达水平。结果:与正常足细胞组相比,FABP3过表达足细胞组细胞内TG和游离脂肪酸水平增加(P<0.05),而FABP3-siRNA足细胞组TG和游离脂肪酸水平下降(P<0.05)。不论在正常环境还是PA环境下,与正常足细胞组相比,FABP3过表达足细胞组PPARα mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05),而ACOX3 mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05); FABP3-siRNA足细胞组PPARα mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05),而ACOX3 mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05)。与FABP3过表达足细胞组相比,FABP3-siRNA足细胞组PPARα mRNA和蛋白表达上调(P<0.05),ACOX3 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05);加入PA后,FABP3过表达足细胞+PA组和FABP3-siRNA 足细胞+PA组之间PPARα mRNA和蛋白表达、ACOX3 mRNA和蛋白表达的差异具有显著统计学意义(P<0.01)。结论:FABP3过度增加可导致足细胞脂肪代谢紊乱,抑制FABP3过度增加可纠正足细胞脂肪代谢紊乱状态。该研究结果提示抑制FABP3表达可能对代谢因素如糖尿病、肥胖、高脂血症所致肾脏足细胞损伤有一定防御和治疗作用。