肾脏病与透析肾移植杂志 ›› 2022, Vol. 31 ›› Issue (6): 537-543.DOI: 10.3969/j.issn.1006-298X.2022.06.007
GUO Cheng,YE Fangxiong,YANG Xueyan,LI Wei,WAN Yuhan,YANG Dingping
摘要: 目的:研究鸢尾素对脓毒症相关急性肾损伤(SAAKI)是否具有保护作用及其作用机制。
方法:采用脂多糖(LPS)建立了体内和体外动物模型。用全自动生化分析仪测定血清肌酐(SCr)和血尿素氮(BUN),苏木精伊红(HE)染色观察肾脏病理改变。利用DNA 断裂的原位末端标记法(TUNEL法)检测组织细胞凋亡。免疫印迹法检测肾组织解偶联蛋白2(UCP2)、bcl2原癌基因的编码蛋白(Bcl2)、激活半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(ccaspase3)、Bcl2样蛋白4(Bax)、白细胞介素(IL)1β、IL6、肿瘤坏死因子α(TNFα)、肾损伤分子1(KIM1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)和甘油醛3磷酸脱氢酶(GAPDH)的表达。ELISA检测血清IL1β、IL6、TNFα的水平。RTqPCR检测UCP2、纤维连接蛋白Ⅲ型含结构域蛋白5(FNCD5)和pAMPK mRNA水平。
结果:体内实验,腹腔注射LPS导致小鼠肾功能受损、肾小管损伤评分水平升高,在补充鸢尾素后,能显著改善肾功能并降低损伤评分。研究发现鸢尾素显著降低肾组织和血清炎症因子(TNFα,IL1β和IL6)水平,改善SAAKI的炎症反应。分析Bcl2、ccaspase3、Bax的水平和TUNEL法检测结果表明,鸢尾素显著改善细胞凋亡。体外实验:测定肾近端小管上皮细胞(HK2)内ROS水平,表明鸢尾素显著改善SAAKI的氧化应激反应。通过体外实验研究鸢尾素与AMPK和UCP2的线性关系,发现鸢尾素可能是通过AMPK/UCP2信号转导途径上调SAAKI中UCP2的表达从而发挥作用。
结论:鸢尾素通过上调线粒体UCP2的表达在SAAKI中发挥保护作用。鸢尾素有望成为治疗LPS相关AKI的潜在药物。