摘要:
目的:将低氧诱导因子1α(HIF-1α)基因质粒高效感染人脂肪源性干细胞(hADSCs),并与顺铂诱导的人近端肾小管上皮细胞系(HK-2)共孵育,观察hADSCs对HK-2细胞损伤的影响。 方法:以慢病毒为载体,将HIF-1α转染hADSCs,与顺铂诱导的HK-2细胞共孵育。电镜观察HK-2细胞形态、结构的变化;原位末端标记(TUNEL)检测细胞凋亡指数;Western blot检测HK-2细胞caspase-3、Bcl-2的变化及hADSCs细胞促红细胞生成素(EPO)、血红素氧化酶1(HO-1)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达,ELISA检测培养液中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子1(KIM-1)的浓度及EPO、HO-1、VEGF、HIF-1α的浓度变化。 结果:① 与顺铂诱导组相比,共孵育后的HK-2细胞结构的损伤减轻、凋亡的细胞减少,caspase-3的表达低于顺铂诱导组、Bcl-2的表达水平升高;其中HIF-1α转染的hADSCs与HK-2细胞共孵育后,HK-2细胞损伤明显减轻,凋亡蛋白的变化更为明显。② 顺铂诱导组培养液中NGAL、KIM-1浓度升高,以KIM-1变化明显(P<0.05);细胞共孵育后培养液中KIM-1浓度降低,转染组较明显。③ 转染后的hADSCs细胞内EPO、HO-1、VEGF的蛋白表达升高;培养液中HO-1、VEGF含量增高(P<0.05),HIF-1α、EPO的含量变化不明显。结论:hADSCs与HK-2共孵育后,可以减轻顺铂诱导的HK-2细胞结构的损伤、抑制细胞的凋亡,HIF-1α转染hADSCs后其作用更为明显,可能与细胞保护因子的高表达有关。