肾脏病与透析肾移植杂志 ›› 2018, Vol. 27 ›› Issue (3): 245-249.DOI: 10.3969/j.issn.1006-298X.2018.03.009
摘要:
目的:探讨血细胞样本长期(10年以上)低温保存后获得DNA的质量和产量情况。
方法:选取南京总医院国家肾脏疾病临床医学研究中心生物样本库低温(-80℃)保存10年以上3 ml抗凝血分离得到的血细胞样本150份,采用全自动核酸提取仪(磁珠法)提取DNA,Nanodrop 2000测定DNA的纯度和产量,琼脂糖凝胶电泳检查DNA完整性。
结果:150份血细胞样本提取的DNAA260/A280平均值为184,A260/A230平均值为227,产量平均值为18757 μg。所有样本凝胶电泳均可见DNA条带比较集中,未见弥散分布,分子量≥20 kb。150份DNA中,134份17≤A260/A280≤19,占893%;120份A260/A230≥20,占80%;115份17≤A260/A280≤19且A260/A230≥20,占767%。143份DNA产量≥10 μg,占953%。其中,DNA产量≥10 μg且17≤A260/A280≤19有132份,占88%。DNA产量≥10 μg,17≤A260/A280≤19且A260/A230≥20有114份,占76%;
结论:绝大部分低温保存10年以上的血细胞样本磁珠法提取的DNA质量和产量都可满足下游实验要求。该研究为从长期低温保存的血细胞样本中提取DNA用于科学研究提供参考。