摘要:
[摘要]目的: 研究锌离子(Zn)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)转分化(EMT)的影响及其机制,从而为锌离子在腹膜透析(PD)中的应用提供理论基础。方法:胰蛋白酶消化法原代培养腹膜间皮细胞、传代、经鉴定后分组:(1)正常对照组; (2)脂多糖组: 100μM作用48h;(3) ZnSO4作用组:30μM ZnSO4作用24h后加100μM脂多糖作用48h。应用RT-PCR方法和免疫荧光方法检测α 平滑肌肌动蛋白(α-SMA )、上皮钙黏素(E-cadherin) 、Ⅰ型胶原酶(collagen I)基因表达。应用western blotting检测 NF-κB、 I-κB 、p-NF-κB、 p-I-κB蛋白表达;应用流式细胞术,采用活性氧自由基(ROS)检测试剂盒检测各组别的ROS情况。结果:LPS培养48h后细胞形态开始发生变化,由典型的上皮逐渐变为梭形及不规则形,类似肌成纤维细胞,而ZnSO4作用组细胞表型改变明显减轻。与对照组相比,LPS组RPMC的α-SMA 、collagen I基因表达明显升高,而E-cadherin 基因表达降低;与LPS组相比,ZnSO4作用组RPMC的α-SMA、collagen I表达明显降低、E-cadherin 基因表达增多;LPS组ROS显著高于对照组,ZnSO4作用组ROS显著低于LPS组;与LPS组相比,ZnSO4作用组p-NF-κB、p-I-κB蛋白表达降低。结论: ZnSO4可逆转LPS所致的RPMC的 EMT,对腹膜透析过程中所导致的RPMC损伤具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制氧化应激反应和NF-κB信号通路转导而发挥作用。