肾脏病与透析肾移植杂志 ›› 2023, Vol. 32 ›› Issue (5): 443-448.DOI: 10.3969/j.issn.1006-298X.2023.05.008
摘要: 目的:探讨在高糖条件下小鼠肾小球系膜细胞(MGMC)中lncRNA-Gm4419与miR-7214-3p结合对炎症、纤维化和增殖的影响。
方法:qRT-PCR测定低糖组(5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇)和高糖组(25 mmol/L葡萄糖)MGMC中miR-7214-3p的表达水平;生物信息学预测lncRNA-Gm4419与 miR-7214-3p的结合位点;荧光素酶报告基因方法检测MGMC中lncRNA-Gm4419与miR-7214-3p的结合能力;qRT-PCR检测单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、纤维蛋白(Fn)和胶原蛋白Ⅳ(Col.Ⅳ)的表达水平,流式细胞术和细胞计数试剂盒(CCK8)方法测定细胞增殖能力。
结果:在高糖培养下,MGMC中miR-7214-3p的表达水平显著降低(P<0.05)。在低糖组中,沉默miR-7214-3p后MCP-1、TNF-α 、IL-1β、Fn和Col.Ⅳ表达水平升高,系膜细胞增殖能力增强(P<0.05);在高糖组中,过表达 miR-7214-3p后MCP-1、TNF-α 、IL-1β、Fn和Col.Ⅳ表达水平降低,系膜细胞增殖能力减弱(P<0.05)。MGMC过表达lncRNAGm4419后MCP-1、TNF-α 、IL-1β、Fn和Col.Ⅳ表达水平升高,系膜细胞增殖能力增强(P<0.05);同时过表达lncRNAGm4419和miR72143p组较单独过表达lncRNA-Gm4419组,MCP-1、TNF-α 、IL-1β、Fn和Col.Ⅳ表达水平降低,系膜细胞增殖能力减弱(P<0.05)。
结论:在高糖条件下,lncRNA-Gm4419通过抑制 miR-7214-3p的表达来促进系膜细胞的炎症反应、纤维化形成和增殖。