肾脏病与透析肾移植杂志 ›› 2018, Vol. 27 ›› Issue (1): 41-45.DOI: 10.3969/cndt.j.issn.1006-298X.2018.01.008
摘要:
目的:通过体外细胞培养,观察不同浓度枸橼酸对内毒素(LPS)诱导的单核细胞分泌细胞因子功能的影响。
方法:采用标准方法体外培养人类单核细胞株(THP1),加入适量枸橼酸三钠(TSC)使其体外培养液TSC浓度分别为0、05 mmol/L、10 mmol/L,并给予不同浓度LPS(005 μg/ml、01 μg/ml、1 μg/ml)刺激,分别于刺激后6h、12h、24h、48h用CCK8试剂盒测定细胞活性、ELISA试剂盒测定上清液细胞因子白细胞介素6(IL6)、肿瘤坏死因子α(TNFα)水平及血气分析仪测定培养基内离子钙(Ca2+)水平。使用正常培养条件下的单核细胞做为对照组。
结果:不同浓度TSC对单核细胞活性无抑制作用(P>005),但对不同时间点LPS诱导的单核细胞分泌细胞因子(TNFα和IL6)功能有一定影响,培养基TSC浓度05 mmol/L和10 mmol/L时,培养12h和24h TNFα的分泌量显著高于对照组(P<001);TSC浓度为05 mmol/L时,IL6在24h开始出现分泌增高趋势,48h达到峰值(P<005),TSC浓度10 mmol/L显著抑制IL6分泌(P<001)。
结论:本实验采用的TSC浓度不存在细胞毒性,单核细胞在此浓度下,受LPS刺激时表现出TNFα分泌亢进的现象,而IL6的分泌则表现出TSC低浓度下亢进,高浓度下受抑制的趋势。