摘要:
目的:探讨氟伐他汀对嘌呤霉素刺激下足细胞黏附分子β1整合素表达的影响及可能机制。 方法: 体外培养的永生化人足细胞分为以下4组:①正常对照组;②DMSO(1mg/ml)对照组;③嘌呤霉素(PAN, 1.0ug/ml)组:PAN分别培养足细胞12、24、48、72h;④PAN(1.0ug/ml) + 氟伐他汀(fluvastatin,FLV,1×10-8~1×10-5 M)组,嘌呤霉素分别与不同浓度氟伐他汀共同培养足细胞48h。用Western 印迹和DCFHDA(2’,7’-二氯荧光素-3’,6’-二乙酸酯 )分别检测以上4组足细胞β1整合素和活性氧簇(ROS,reactive oxygen species)的表达。MTT(3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑,简称噻唑蓝)法检测足细胞活力,其分组为:①正常对照组;②DMSO对照组;③PAN(1.0ug/ml)组;④PAN(1.0ug/ml)+ FLV(1×10-8~1×10-5 M)组;⑤FLV(1×10-8~1×10-5 M)组,以上5组分别培养12、24、48、72h。 结果: 与正常对照组相比,PAN分别作用24、48、72h后,β1整合素表达逐渐下降、ROS表达则明显升高(P<0.05)。氟伐他汀干预后,β1整合素表达水平升高、ROS表达水平下降,以氟伐他汀浓度为1×10-7M作用48h效果最明显(P<0.05)。相关性分析发现,PAN组以及PAN+FLV组足细胞β1整合素水平与细胞内ROS表达水平成负相关。MTT结果表明DMSO以及氟伐他汀浓度为1×10-8M和1×10-7M对足细胞的存活无明显影响(P>0.05),而氟伐他汀浓度为1×10-6M和1×10-5M、PAN组、PAN+FLV组,在24h均明显抑制足细胞的活力(P<0.05)。与PAN组相比,嘌呤霉素与1×10-7M氟伐他汀共同作用48h足细胞活力有明显的改善(P<0.05)。 结论: 嘌呤霉素可致体外培养足细胞的β1整合素表达下降,氟伐他汀上调β1整合素的表达,保护足细胞。此机制与氟伐他汀抑制足细胞内ROS的表达相关。